青海發(fā)光桿菌的分離,可分為孢子分離法、組織分離法以及基內(nèi)菌絲分離等。
1.孢子分離法
孢子分離法,是用食用菌的有性孢子或無性孢子萌發(fā)成菌絲,培養(yǎng)成菌種的方法。這種菌種生活力較強(qiáng),但孢子個體之間有差異,且自然分化現(xiàn)象較嚴(yán)重,變異大,需經(jīng)出菇試驗才能在上應(yīng)用。
(l)單孢分離法:是每次或每支試管只取一個擔(dān)孢子, 讓它萌發(fā)成菌絲體來獲得純菌種的方法。蘑菇和草菇用單孢分離得到的菌絲,有結(jié)實能力,可采用此法分離純菌種。單孢分離上較少采用,而且技術(shù)復(fù)雜,一般采用多孢分離法。
(2)多孢分離法:就是把許多孢子接種在同一培養(yǎng)基上,讓它們萌發(fā)、自由交配來獲得食用菌純菌種的一種方法。具體操作方法,有以下幾種:
①種菇孢子彈射法:選擇個體健壯、朵形圓正,無病蟲害、出菇均勻、高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn),適應(yīng)性強(qiáng)的八九分成熟的種菇,切去大部分,青海發(fā)光桿菌柄用無菌水沖洗數(shù)遍后再用已滅菌的紗布或脫脂棉、濾紙吸干表面水分。在接種箱或無菌室內(nèi),把種菇的菌褶朝下用鐵絲倒掛在玻璃漏斗下面,漏斗倒蓋在培養(yǎng)皿上面;上端小孔用棉花塞住。培養(yǎng)皿放在一個鋪有紗布的搪瓷盤上,靜置12~20小時,菌褶上的孢子就會散落在培養(yǎng)皿內(nèi)。形成一層粉末狀孢子印(平菇極淡紫色,蘑菇、草菇 為褐色,香菇、金針菇孢子印白色)。用接種針沾取少量孢子在試管中的瓊脂外面或培養(yǎng)皿上劃線接種。待孢子萌發(fā),生成菌落時,選孢子萌發(fā)早、長勢好的菌落進(jìn)行試管培養(yǎng)。
V5 tag標(biāo)簽IgG 小鼠克拉拉蛋白(CC16)
VEGFIgG 小鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)
v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A(禽流感)IgG 小鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)
VSV-G tag標(biāo)簽IgG 小鼠可溶性瘦素受體(sLR)
WEE1蛋白IgG 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)
Wnt信號抑制因子1IgG 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)
WRCH1IgG 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)
XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白IgG 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)
X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白IgG 小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)
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