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    免疫熒光測定

    點擊次數(shù):1652次  更新時間:2015-06-30

        評估免疫熒光干式定量法檢測全血C-反應(yīng)蛋白(CRP)的臨床應(yīng)用價值。方法150例住院患者,采用免疫熒光干式定量法檢測全血CRP,采用常規(guī)免疫比濁法檢測血清CRP,檢測結(jié)果用統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析。結(jié)果與常規(guī)免疫比濁法檢測血清比較,使用免疫熒光干式定量法檢測全血,兩種方法所得的CRP檢測結(jié)果相符,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論采用免疫熒光干式定量法檢測全血CRP,具有快速、簡便、結(jié)果可靠等特點,可作為臨床一種快速檢測感染過程和自身免疫疾病的工具。

        激光掃描共聚焦顯微鏡可以對經(jīng)過熒光標(biāo)記的組織標(biāo)本共聚焦熒光進行定量分析.并顯示熒光沿Z軸的強度變化。它除了可以對單、雙或三重標(biāo)記的細胞及組織標(biāo)本的熒光進行定量、定位分析外,還可以借助顯微CT功能在不損失分辨率的前提下對標(biāo)本深層進行熒光分布的測量.獲得組織形態(tài)結(jié)構(gòu)信息。激光掃描共聚焦顯微鏡同樣適用于高靈敏度的快速免疫熒光測定,從而準(zhǔn)確檢測抗原表達、熒光原位雜交斑點及組織細胞結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)特性,并作定量分析。
     
        先按照免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)進行熒光染色,再用激光掃描共聚焦顯微鏡對其進行定量和形態(tài)學(xué)分析。我國學(xué)者為確定某些物質(zhì)(如豬苓多糖)是否對培養(yǎng)的膀胱癌T!;:細胞抑癌基因p53和抑制細胞凋亡基因蛋白H-fas表達有調(diào)節(jié)作用,用激光掃描共聚焦顯微鏡對經(jīng)免疫熒光細胞化學(xué)染色的細胞進行共聚焦熒光斷層掃描成像,每個細胞掃32個切面,用三維和定量軟件觀察與測定細胞內(nèi)熒光變化,細胞培養(yǎng)24小時,對照組p53主要在細胞核內(nèi)表達,陽性信號呈黃綠色亮點,點狀分布,呈現(xiàn)一核多點表達,熒光強度較弱,為119±43。實驗組細胞核內(nèi)強熒光,為170±13,細胞質(zhì)內(nèi)也有強表達,呈彌散性分布。對于培養(yǎng)細胞的H-fas基因蛋白表達也作了同樣的檢測。通過對不同組培養(yǎng)細胞熒光強度的測定得出:豬苓多糖對膀胱癌T24 細胞p53基因蛋白表達有一定調(diào)節(jié)作用.對H-fas基因蛋白 表達無明顯影響(曾星等,2003)。近年來,應(yīng)用激光共聚焦掃描顯微鏡對腫瘤相關(guān)抗原等進行定性定量研究的報道頗多,由此可見,激光掃描共聚焦顯微鏡在這一領(lǐng)域的應(yīng)用十分廣泛。

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