細胞培養(yǎng)操作:
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
DMEM/F12培養(yǎng)基DMEM/F12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復雜,含有多種微量元素,和DMEM以1:1結合,稱為DMEM/F12培養(yǎng)基(DME/F12medium),作為開發(fā)無血清配方的基礎,以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養(yǎng)。為了增強該培養(yǎng)基的緩沖能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES緩沖液。
運輸
放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法
基礎培養(yǎng)基2℃~8℃,培養(yǎng)添加劑 -20℃,避光,保存12個月。配置好的培養(yǎng)基2℃~8℃保存1-2個月。
質量控制
檢測項目 | 質量控制 | |
澄清度 | 澄清 | |
PH | 7.3±0.2 | |
內毒素含量 (EU/mL) | ≤10 | |
無菌檢測 | 細菌 | 陰性 |
真菌 | 陰性 | |
支原體 | 陰性 | |
細胞生長試驗 | 細胞形態(tài) | 正常 |
細胞生長實驗 | 合格 |
注意事項
1、收到產品請先檢查包裝是否完好,如有破損,漏液、渾濁等現象請及時聯系我們,培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響產品正常使用。
2、請仔細閱讀產品說明書,了解產品使用方法、保存方式、有效期等信息,若因操作失誤,保存不當而導致產品出現污染等問題的,責任由客戶自行承擔。
3、本產品僅能用于科研,培養(yǎng)基中的一些組分對人體有較低的危害性,如有接觸立即用大量清水沖洗即可。
細胞培養(yǎng)概念:
細胞培養(yǎng)(cell culture)是指在體外模擬體內環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。
細胞培養(yǎng)可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng);直接從體內獲取的組織細胞進行培養(yǎng)為原代培養(yǎng);當原代培養(yǎng)的細胞增殖達到一定密度后,則需要做再培養(yǎng),即將培養(yǎng)的細胞分散后,從一個容器以1:2或其他比率轉移到另一個或幾個容器(同樣底面積的容器)中擴大培養(yǎng),為傳代培養(yǎng),傳代培養(yǎng)的累積次數就是細胞的代數。
公司正在出售的產品:
小鼠X-射線修復交叉互補蛋白5(XRCC5)ELISA試劑盒 ,英文名: XRCC5 ELISA Kit
人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA檢測試劑盒HumanplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 96T/48T
大鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)免疫試劑盒 Rat maix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA kit
英文名稱RatCCL26ELISAKit大鼠CCL26規(guī)格:96T/48T
口香糖比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitSRF/IF人皮膚反應因子/炎性因子規(guī)格:48T/96T
鴨脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒
HumaninhibinB,INH-BELISAKit 人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforACTH(mouseadrencocoicoopichormone)ELISAKit小鼠促腎上腺皮質激素規(guī)格:48T/96T
血液組織纖維型蛋白溶酶原?鄨?
DMEM/F12培養(yǎng)基島素樣生長因子結合蛋白-1 英文名稱: insulin-like growth factors binding protein-1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IGFBP-1
島素樣生長因子結合蛋白-2 英文名稱: insulin-like growth factors binding protein-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IGFBP-2
島素樣生長因子結合蛋白-3 英文名稱: insulin-like growth ?鄨?
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